Постоянная экспозиция Музея истории донского казачества занимает весь первый этаж здания Музея - 5 залов.
  Экспозиция построена на принципах хронологической последовательности и состоит из уникальных подлинных предметов. Представленные в ней предметы охватывают многообразие всего нашего музейного собрания, характеризуя его полноту и уникальность. В постоянной экспозиции нашли свое место наиболее ценные экспонаты из фондовых коллекций музея: знаменной, живописной, оружия, регалий и наград.
  Экспозиция отражает основное направление деятельности музея - военно-историческое, тесно связанное с лучшими традициями донского казачества.

1. Древнейшая история Дона.
2. Природа Дикого Поля (XIII-XIV вв).
3. Возникновение Донского казачества.
4. Участие казаков в войнах России XVIII-XIX вв.
5. Донское казачество в пореформенный период (XIX-XX вв.).